1、血液病项目样品取材及物流运送注意事项
（1）适用范围：
①融合基因检测项目（BCR-ABL, PMLl-RARa, AML1-ET0,融合基因筛査等）
样品要求:EDTA抗凝骨髓（首选），EDTA抗凝外周血（可选）。
需要用EDTA抗凝管。每个检验项目最少样品量为2ml,同时检测多个项目需要5～6ml（3支EDTA抗凝 管）。（样品量与骨髓白细胞含量有关，若患者白细胞量偏低,需要增加送检样品量。特别注意抗凝管的最多装血量为2ml,血量超过要求会导致抗凝剂不够而造成凝血。可以多取几管样品送检，每管装血量保持在装血量要求内。）
②白血病FISH检测项目
样品要求:肝素抗凝骨髓（首选），肝素抗凝外周血（可选）。组织切片
血液样品：最少样品量为2ml。（样品量与骨髓白细胞含量有关，若患者白细胞量偏低，需要增加送检样品量。特别注意抗凝管的 最多装血量<每种抗凝管的规格不同，注意管上标签上的标识记号>，血量超过要求会导致抗凝剂不够而造成凝血。可以多取几管样品送检，每管装血量保持在装血量要求内。）
组织切片:每个项目3～5张白片，切片厚度要求3～4μm。
★样品类型的选择原则详见备注说明,供医生参考。
（2）样品取材
骨髓穿刺步骤按照常规骨髓穿刺术操作进行，需要注意：在抽取骨髓前，吸取少量肝素，将针头和注射器壁润湿，然后将多余肝素打出针管 ，再抽取骨髓。（肝素过多会影响PCR检测，也会导致凝血但不加肝素取骨髓时易发生凝血，所以需要添加适量肝素确保样品在取材时不发生凝血现象）
抽取骨髓后，立即拔除针头后再将骨髓注射到抗凝管中,为避免溶血，注射过程要控制速度，不可过快。注射后，立即将抗凝管轻柔上下颠倒数次（至少10次），使抗凝剂和骨髓液充分混匀。（抗凝剂混合不均匀是导致样品凝血的重要因素之，而且混合不均匀导致的凝血 经常是在送检过程中才发生的，不易在取材时被及时发现，因此需要特别注意。另外，剧烈的晃动易导致溶血，因此要轻揉操作。）
（3）样品在医院的保存要求
样品需要当天送检。医院抽取骨髓样品后,需在申请单上记录采集时间，自采集时间幵始48小时内送达特检实验室。到接收员取样品前，样品需存放于常温(20°C以下)条件下。
（4）物流运送
接收员取样品时，需要检查样品是否有凝块或溶血现象。首先，在样品静置状态下，检查上层血浆及下层血细胞颜色，判断是否溶血 (判断标准与全血相同)。然后，将样品管缓慢倾斜倒转，检查是否有固体凝块。
若检查发现样品存在凝块或溶血,视为不合格样品。不能接收，并通知院方。如果院方坚持送检，则需在该样品的检验申请单上注明 “样品不合格，医生要求操作”，井清医生签字。以便后续责任追踪调查及收费。
若样品性状合格，则按照物流规范流程接收样品并直立放置。运送条件为18-25°C冷藏运输，自采集时间开始48小时内送达特检实验 室(24小时内较佳,48小时可接受)。
（5）样品的实验室保存
样品送达公司后，尽可能快速操作。
（6）备注说明
血液病患者的骨髓样品性状因患者所患疾病类型,个人身体状况，疾病进程等因素的不同，样品性状差异较大。特别是血细胞数量偏 高，尤其是血小板量偏高的患者，骨髓液呈高凝状态。也存在采取上述取材措施仍然无法避免凝血发生的患者。
本着对患者和医院尽可能提供周到检测服务的宗旨，对于在釆集骨髓时就发生凝血现象并且无法用现有方法手段解决的患者'可以 在医生和患者知情并同意的情况下，对凝血样品进行操作。另外，为了帮助患者争取更多治疗时间，建议同时送检外周血样品,并备注说明" 若骨髓样品无法检测，可以作为备选样品检测”。但由于血液病病灶部位在骨髓，因此外周血检测阴性结果不能代表骨髓检验结果。骨髓 样品为首选样品，外周血样品为可选样品。
另外建议在样品取材顺利的情况下，尽可能选择骨髓样品送检，特别是初诊患者。若定期检测白血病微小残留病灶（融合基因），在病人状况不合适采骨髓的情况下，可选择外周血检测，评价外周血象的缓解状况。但若需要通过检测结果判断病情是否已经处于分子生物学完全缓解，还是需要检测骨髓样
2、肿瘤项目样品及物流运送注意事项
（1）肿瘤基因表达水平检测项目（ERCC1基因表达水平、PTEN基因表达水平、RRM1基因表达水平、TS基因表达水平、|J-tubulinⅢ基 因表达水平等）
包埋蜡块或者石蜡切片，切片厚度约3-5um,每片面积在250mm²（若每片面积不能达到要求，则增加送检切片数量），单个检测项目 手术组织白片数S5-10片；组织切片中肿瘤细胞占比应大于30%；穿刺组织玻片数量3张，每张玻片6个切面，每增加一^检测项目增加 白片2张或玻片1张（穿刺组织）,此类样品收样时提前告知失败风险。石蜡切片■和穿刺玻片都不可做防脱片处理,且不能做烤片处理°
（2）肿瘤突变类检测项目（EGFR基因突变（ARMS法）,KRAS基因突変，kit和PDGF基因突变，PIK3CA基因突变等）
包埋蜡块、石蜡切片或新鲜组织（不推荐）三者任选一项，且组织切片中肿瘤细胞占比应大于30%。切片厚度约3_5um,单个检测项目 手术组织白片数量5～10片;穿刺组织玻片数量3张，每张玻片6个切面，每增加一个检测项目増加白片2张或玻片1张（穿刺组织）,此类样 品收样时提前告知失败风险;新鲜组织（不推荐）要求10%中性福尔马林缓冲液固定,组织量不少于30mm3,即组织总体积不少于米粒大 小。石蜡切片和穿刺玻片都不可做防脱片处理，且不能做烤片处理。
EGFR基因突变检测（ARMS法）接受血浆样品，需要分离血浆量达到5ml。外周血样品釆集后需在2小时内离心分离血浆。为了避免外周血样品在四输过程中的溶血以及血浆量不够的情况，建议在医院采集EDTA抗凝外周血后即进行血浆的分离，直接送检5ml血浆样品到实驶室。
（3）肿瘤基因多态性类检测项目（ERCC1基因多态性,xrcci基因多态性,ugtiai基因多态性,GSTM1基因多态性,GSTP1基因多在性，JPMT基因多态性，DPD基因多态性,MTHFR基因多态性等）
样品要求・EDTA抗凝全血.最少样品量为2ml。特别注意抗凝管的最多装血量（每种抗凝管的规格不同,注意管上标签上的标识记号）， 血量不可过多或过少。
接收员取样品时，需要检查样品是否有凝块或溶血现象。首先，在样品静置状态下,检查上层血浆及下层血细胞颜色,判断是否溶血（判断标准与全血相同）。然后，将样品管缓慢倾斜倒转，检查是否有固体凝块。
若检查发现样品存在上述现象之-,视为不合格样品。不能接收,并通知院方。如果院方坚持送检,则需在该样品的检验申请单上注 明“样品不合格，医生要求操作，并请医生签字。以便后续责任追踪调查。若样品性状合格，则按照物流规范流程接收样品。运送条件为 18～25°C常温运输，自釆集时间开始24小时内到达特检实验室。注意样品若需与其他样品共同放置在冷藏环境下运输,为了避免样品直接接触冰袋，可将样品与冰袋（1～2个）间用约3层厚的毛巾或相应厚的纱布隔开，以保证样品的配送温度恒定，便于下一步培养。
（4）肿瘤基因扩增类检测项目（EGFR基因扩增FISH检测.HER-2扩增FISH检测等）
样品要求：蜡块，石蜡切片，两者任选一项，包埋时间为半年内且肿瘤细胞占比应大于50%,石蜡切片样品要求切片厚度为2～3μm, 数量不少于3～5片（玻片必须经过防脱片处理）。
样品在医院的保存要求:血液样品需要当天送检，样品釆集后需在申请单上记录釆集时间，自釆集时间开始48小时内到达特检实验室。医院抽取血液样品后，到接收员取样品前，样品需存放于常温（25°C以下）。
蜡块，石蜡切片，常温下保存即可。
物流运送:若样品性状合格，则按照物流规范流程接收样品。血液样品运送条件为常温（25°C以下）运输，自釆集时间开始48小时内到 达特检实验室。蜡块，石蜡切片，运送条件为常温运输。
样品的实验室保存:样品送达公司后,全血样品存放于常温（25°C以下），蜡块，石蜡切片，常温保存。若样品需要外包到杭州，送检物 流要求请参照上面的条款。
备注说明：由于肿瘤患者的组织存在较大的个体间差异，不同患者同样性状的组织内检测物质的含量由于肿瘤的分期不同，取材时间 不同等各种复杂原因而存在较大差异，有些未知原因会造成检测失败，请在送检前特别关注。
送检未按照以上取材要求的，可以在医生和患者知情同意并签署相关文件的情况下，对样品进行操作（并予以收费），但检测能否成功 存在一定风险，请特别关注。报告发放及格式请参照报告单模板。
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